RNAsimple Toplam RNA Kiti

Yaygın olarak kullanılan santrifüj kolon kullanılarak yüksek verimli toplam RNA ekstraksiyonu için.

RNAsimple Total RNA Kiti, guanidinyum izotiyosiyanat/fenol yöntemine dayalı yeni bir RNA ekstraksiyon yöntemini benimser. TIANGEN tarafından özel olarak tasarlanan Buffer RZ, genomik DNA'yı ve proteinleri hücrelerden hızlı ve verimli bir şekilde çıkararak elde edilen RNA'yı oldukça saf ve kararlı hale getirebilir.
Bu kit, toplam RNA'yı kandan, hayvan hücrelerinden, dokulardan ve bitki dokularından ayırmak için kullanılır. Her spin kolonu 50-100 mg doku veya 5×10 doku işleyebilir6hücreler bir seferde ve aynı anda çok sayıda farklı numuneyi işleyebilir. Reaksiyon bir saatten daha kısa sürede tamamlanabilir ve ekstrakte edilen toplam RNA, DNA ve protein kontaminasyonu olmadan daha yüksek verim, daha iyi saflığa sahiptir ve çeşitli akış aşağı deneylerde kullanılabilir.

Kedi. Numara Paket boyutu
4992858 50 hazırlık

Ürün ayrıntısı

iş akışı

Deneysel Örnek

SSS

Ürün etiketleri

Özellikleri

■ Yüksek saflıkta kullanıma hazır RNA, hassas aşağı akış uygulamaları için uygundur.
■ Geniş uygulamalar: Saflaştırılmış RNA, çeşitli deneysel numunelere uygulanabilir.
■ Basit işlemlerle deney 1 saatte tamamlanabilir.

Uygulamalar

■ RT-PCR
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ Gerçek Zamanlı PCR
■ PolyA Tarama, in vitro çeviri, RNaz koruma analizi, moleküler klonlama.

Tüm ürünler ODM/OEM için özelleştirilebilir. Detaylar için,lütfen Özelleştirilmiş Hizmet'e tıklayın (ODM/OEM)


  • Öncesi:
  • Sonraki:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×

    Workflow

    Experimental Example Malzeme: 20 mg sıçan dalak dokusu
    Yöntem: Sıçan dalak dokusunun toplam RNA'sı, RNAsimple Total RNA Kiti kullanılarak izole edildi.
    Sonuçlar: Lütfen yukarıdaki agaroz jel elektroforez resmine bakın. Şerit başına 2-4 ul 100 ul elüat yüklendi. Elektroforez, % 1 agaroz üzerinde 30 dakika boyunca 6 V/cm'de gerçekleştirildi.
    S: Sütun tıkanıklığı

    A-1 Hücre lizizi veya homojenizasyonu yeterli değil

    ---- Numune kullanımını azaltın, lizis tamponu miktarını artırın, homojenizasyon ve lizis süresini artırın.

    A-2 Numune miktarı çok büyük

    ---- Kullanılan numune miktarını azaltın veya lizis tamponu miktarını artırın.

    S: Düşük RNA verimi

    A-1 Yetersiz hücre lizizi veya homojenizasyon

    ---- Numune kullanımını azaltın, lizis tamponu miktarını artırın, homojenizasyon ve lizis süresini artırın.

    A-2 Numune miktarı çok büyük

    ----Lütfen maksimum işleme kapasitesine bakın.

    A-3 RNA kolondan tamamen ayrıştırılmaz

    ---- RNazsız su ekledikten sonra santrifüjlemeden önce birkaç dakika bekletin.

    Eluentte A-4 Etanol

    ---- Duruladıktan sonra tekrar santrifüjleyin ve yıkama tamponunu mümkün olduğunca uzaklaştırın.

    A-5 Hücre kültürü ortamı tamamen çıkarılmamış

    ---- Hücreleri toplarken, lütfen kültür ortamını mümkün olduğunca çıkardığınızdan emin olun.

    A-6 RNAstore'da saklanan hücreler etkin bir şekilde santrifüj edilmiyor

    ----RNAstore yoğunluğu, ortalama hücre kültürü ortamından daha fazladır; bu yüzden merkezkaç kuvveti arttırılmalıdır. 3000x g'de santrifüj edilmesi önerilir.

    A-7 Düşük RNA içeriği ve numunede bolluk

    ---- Düşük verimin numuneden kaynaklanıp kaynaklanmadığını belirlemek için pozitif bir numune kullanın.

    S: RNA bozulması

    A-1 Malzeme taze değil

    ---- Taze dokular sıvı nitrojen içinde hemen saklanmalı veya ekstraksiyon etkisini sağlamak için hemen RNAstore reaktifine konmalıdır.

    A-2 Numune miktarı çok büyük

    ---- Numune miktarını azaltın.

    A-3 RNaz kontaminasyonun

    ----Kit içinde verilen tampon RNaz içermemesine rağmen, ekstraksiyon işlemi sırasında RNaz'ı kontamine etmek kolaydır ve dikkatli kullanılmalıdır.

    A-4 Elektroforez kirliliği

    ---- Elektroforez tamponunu değiştirin ve sarf malzemelerinin ve Yükleme Tamponunun RNase kontaminasyonu içermediğinden emin olun.

    A-5 Elektroforez için çok fazla yükleme

    ---- Örnek yükleme miktarını azaltın, her bir kuyunun yüklenmesi 2 μg'yi geçmemelidir.

    S: DNA kontaminasyonu

    A-1 Numune miktarı çok büyük

    ---- Numune miktarını azaltın.

    A-2 Bazı numuneler yüksek DNA içeriğine sahiptir ve DNase ile işlenebilir.

    ---- Elde edilen RNA çözeltisine RNase-Free DNase işlemi uygulayın ve RNA, işlemden sonra sonraki deneyler için doğrudan kullanılabilir veya RNA saflaştırma kitleri ile daha fazla saflaştırılabilir.

    S: Deneysel sarf malzemelerinden ve cam eşyalardan RNase nasıl çıkarılır?

    Züccaciyeler için 150°C'de 4 saat pişirilir. Plastik kaplar için, 10 dakika boyunca 0,5 M NaOH'ye daldırılır, ardından RNaz içermeyen suyla iyice durulanır ve ardından RNaz'ı tamamen çıkarmak için sterilize edilir. Deneyde kullanılan reaktifler veya solüsyonlar, özellikle su, RNaz içermemelidir. Tüm reaktif preparasyonları için RNaz içermeyen su kullanın (temiz bir cam şişeye su ekleyin, %0,1'lik (V/V) nihai konsantrasyona kadar DEPC ekleyin, gece boyunca çalkalayın ve otoklavlayın).

    Mesajınızı buraya yazın ve bize gönderin