RNAprep Saf Doku Kiti

Hayvan dokularından 100 μg'ye kadar toplam RNA'nın saflaştırılması için.

RNAprep Saf Doku Kiti, etkili döndürme kolonu ve benzersiz tampon sistemi kullanarak toplam RNA'nın hayvan dokularından saflaştırılması için hızlı, basit ve uygun maliyetli bir yöntem sağlar. Kit, silika membran teknolojisini kullanarak yüksek kaliteli RNA'yı saflaştırmak için RNase-Free döndürme kolonları CR3 içerir. Yüksek kaliteli toplam RNA, yüksek saflıkta 40-50 dakikada elde edilebilir ve protein ve genomik DNA kontaminasyonu içermez.

Kedi. Numara	Paket boyutu
4992236	50 hazırlık

Bize e-posta gönder

Ürün ayrıntısı

Deneysel Örnek

SSS

Ürün etiketleri

Özellikleri

■ Hayvan dokuları için optimize edilmiş tamponlar, süreci basit ve kullanışlı hale getirir.
■ Benzersiz DNase I, genomik DNA kontaminasyonunu en aza indirir.
■ Daha yüksek saflıkta ve kullanıma hazır RNA, hassas aşağı akış uygulamaları için uygundur.
■ Fenol/kloroform ekstraksiyonu, LiCl ve etanol çökeltisi ve CsCl gradyanlı santrifüj gerekli değildir, bu da işlemi güvenli ve güvenilir kılar.

Uygulamalar

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ Gerçek Zamanlı PCR.
■ Çip analizi.
■ PolyA Tarama, in vitro çeviri, RNaz koruma analizi ve moleküler klonlama.

Tüm ürünler ODM/OEM için özelleştirilebilir. Detaylar için,lütfen Özelleştirilmiş Hizmet'e tıklayın (ODM/OEM)

Öncesi: RNAprep Saf Hücre/Bakteri Kiti

Sonraki: RNAprep Saf FFPE Kiti

Materyal: 20 mg embriyo (13 gün), 15 mg böbrek, 10 mg karaciğer, 15 mg dalak, 10 mg timus, 20 mg akciğer
Yöntem: Sıçanların farklı doku örneklerinden alınan toplam RNA, RNAprep Pure Tissue Kit kullanılarak saflaştırıldı.
Sonuçlar: Agaroz jel elektroforez resmi yukarıda gösterilmiştir. Şerit başına 2-4 ul 100 ul elüat yüklendi.
M: TIANGEN DNA Markörü III;
Şerit 1-2: Embriyo (13 gün); Şerit 3: Böbrek; Şerit 4-6: Karaciğer; Şerit 7: Dalak; Şerit 8: Timüs; Şerit 9: Akciğer.
Elektroforez, % 1 agaroz jel üzerinde 30 dakika boyunca 6 V/cm'de gerçekleştirildi.

S: Sütun tıkanıklığı

A-1 Hücre lizizi veya homojenizasyonu yeterli değil

---- Numune kullanımını azaltın, lizis tamponu miktarını artırın, homojenizasyon ve lizis süresini artırın.

A-2 Numune miktarı çok büyük

---- Kullanılan numune miktarını azaltın veya lizis tamponu miktarını artırın.

S: Düşük RNA verimi

A-1 Yetersiz hücre lizizi veya homojenizasyon

---- Numune kullanımını azaltın, lizis tamponu miktarını artırın, homojenizasyon ve lizis süresini artırın.

A-2 Numune miktarı çok büyük

----Lütfen maksimum işleme kapasitesine bakın.

A-3 RNA kolondan tamamen ayrıştırılmaz

---- RNazsız su ekledikten sonra santrifüjlemeden önce birkaç dakika bekletin.

Eluentte A-4 Etanol

---- Duruladıktan sonra tekrar santrifüjleyin ve yıkama tamponunu mümkün olduğunca uzaklaştırın.

A-5 Hücre kültürü ortamı tamamen çıkarılmamış

---- Hücreleri toplarken, lütfen kültür ortamını mümkün olduğunca çıkardığınızdan emin olun.

A-6 RNAstore'da saklanan hücreler etkin bir şekilde santrifüj edilmiyor

----RNAstore yoğunluğu, ortalama hücre kültürü ortamından daha fazladır; bu yüzden merkezkaç kuvveti arttırılmalıdır. 3000x g'de santrifüj edilmesi önerilir.

A-7 Düşük RNA içeriği ve numunede bolluk

---- Düşük verimin numuneden kaynaklanıp kaynaklanmadığını belirlemek için pozitif bir numune kullanın.

S: RNA bozulması

A-1 Malzeme taze değil

---- Taze dokular sıvı nitrojen içinde hemen saklanmalı veya ekstraksiyon etkisini sağlamak için hemen RNAstore reaktifine konmalıdır.

A-2 Numune miktarı çok büyük

---- Numune miktarını azaltın.

A-3 RNaz kontaminasyonun

----Kit içinde verilen tampon RNaz içermemesine rağmen, ekstraksiyon işlemi sırasında RNaz'ı kontamine etmek kolaydır ve dikkatli kullanılmalıdır.

A-4 Elektroforez kirliliği

---- Elektroforez tamponunu değiştirin ve sarf malzemelerinin ve Yükleme Tamponunun RNase kontaminasyonu içermediğinden emin olun.

A-5 Elektroforez için çok fazla yükleme

---- Örnek yükleme miktarını azaltın, her bir kuyunun yüklenmesi 2 μg'yi geçmemelidir.

S: DNA kontaminasyonu

A-1 Numune miktarı çok büyük

---- Numune miktarını azaltın.

A-2 Bazı numuneler yüksek DNA içeriğine sahiptir ve DNase ile işlenebilir.

---- Elde edilen RNA çözeltisine RNase-Free DNase işlemi uygulayın ve RNA, işlemden sonra sonraki deneyler için doğrudan kullanılabilir veya RNA saflaştırma kitleri ile daha fazla saflaştırılabilir.

S: Deneysel sarf malzemelerinden ve cam eşyalardan RNase nasıl çıkarılır?

Züccaciyeler için 150°C'de 4 saat pişirilir. Plastik kaplar için, 10 dakika boyunca 0,5 M NaOH'ye daldırılır, ardından RNaz içermeyen suyla iyice durulanır ve ardından RNaz'ı tamamen çıkarmak için sterilize edilir. Deneyde kullanılan reaktifler veya solüsyonlar, özellikle su, RNaz içermemelidir. Tüm reaktif preparasyonları için RNaz içermeyen su kullanın (temiz bir cam şişeye su ekleyin, %0,1'lik (V/V) nihai konsantrasyona kadar DEPC ekleyin, gece boyunca çalkalayın ve otoklavlayın).

Mesajınızı buraya yazın ve bize gönderin